除了用NTA方法,该团队另基于acetylcholinesterase(一种已知的外泌体表达蛋白)评估三种试剂盒提取外泌体的得率。从NTA结果看,对于血1清和血浆样本,Exo-spin的提取量高,是其他两种试剂盒的1-3倍;相对来说,脑脊髓液的提取率都比较低,ExoQuick™提取得到的外泌体浓度低。从基于acetylcholinesterase的分析结果看,其数值高于NTA方法,且Exo-spin得到的外泌体浓度高于其他两种试剂盒。

NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度,但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先,我们必须理解NTA检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。
因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测并计入,而不能筛选出外泌体单独进行计数;同理:也不能通过NTA所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体;例如下图为常见的粒径浓度分布图,可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内,但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证,譬如:透射电镜、western blot等。

外泌体不仅含有蛋白质抗原,还含有分泌细胞来源的mRNA或non-coding RNA(特别是miRNA),其功能引起广泛关注。外泌体的脂质双分子层膜可保护这些RNA,不被RNase分解,在血液、体液中稳定存在。在外泌体及其分泌细胞中均可检测出RNA,也存在仅能在其中之一检测出RNA的情况,因此我们设想存在一种可以选择性将特定的RNA吸收至外泌体的机制。

外泌体的生物学功能:1、首1次报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。
2、进一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。
3、可促进生物体免1疫应答反应。
4、对凝血和血管生成其促进作用。
5、可通过化学信号参与癌细胞的转移。
6、在哺乳期的免1疫调节过程中起到重要的作用。
7、不仅参与触发下游信号传导,而且特异性靶向受体细胞和交换蛋白。
8、可提供特殊的核酸且起到运输功能。
9、作为细胞-细胞之间传递信息的重要分子。
10、在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独1特的作用。

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